生物化学试剂的配置

通过生物学习我们了解到，生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。今天我们就学习生物

　　化学试剂的配置。

　　班氏试剂的配置取无水硫酸铜1.47g,溶于100ml热水中，冷却后稀释到150ml，取柠檬酸钠173g，无水碳酸钠100g和600ml水共热，溶后冷却并加水至850ml，再将冷却的150ml硫酸铜倾入即可。

　　鉴定糖尿的结果

　　沸水浴加热后的现象　　　　　　 　　葡萄糖含量(g/dl)

　　透明蓝色　　　　　　　　　　　　　　　　　　无

　　加热时无变化，仅冷却后有少量沉淀　　　　微量，约0.5以下

　　加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀　　　　少量，约0.5-1

　　加热10-15秒后即出现土黄色沉淀　　　　　中量，约1-2

　　加热时很快出现多量砖红色沉淀　　　　　　大量，约2以上

　　班氏试剂与斐林试剂比较：

　　首先，两者的配方不一样。斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲，0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。而班氏试剂的配方为：①400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜，制成CuO4溶液;③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。

　　其次，两者在反应原理上略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2，Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH-，与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，生成Cu(OH)2，Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。

　　第三，两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反应产生Cu(OH)2，Cu(OH)2很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质，产生的OH-数量有限，与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。

　　无论利用班氏试剂还是斐林试剂，归根结底都是Cu(OH)2与醛基反应而生成砖红色的Cu2O沉淀，因此两者反应现象一样25v;

　　可溶性还原糖的鉴定：

　　生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。

　　(1) 利用斐林试剂：斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，醛基则被氧化为羧基。可见用斐林试剂只能鉴定还原性糖，不能鉴定可溶性的非还原性糖。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

　　(2)利用班氏试剂：班氏试剂由A液(硫酸铜溶液)，B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。将A溶液倾注人B液中，边加边搅，如有沉淀可过滤。实验原理与斐林试剂相似，所不同的是班氏试剂可长期使用。

　　(3) 利用银氨溶液：银氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水，至最初产生的沉淀恰好溶解为止，这时得到的溶液就是银氨溶液。银氨溶液中含有 Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银)，这是一种弱氧化剂，能把醛基氧化成羧基，同时Ag+被还原成金属银。还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜。可见，银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。鉴定的结果是出现银镜。

　　2.用班氏试剂鉴定可溶性还原糖，比用斐林试剂更简便。

　　斐林试剂要现配现用，否则实验难以得到满意结果，因为此反应利用的是斐林试剂中的Cu(OH)2产物作为弱氧化剂参与与还原糖的反应，而我们知道，Cu(OH)2是一种沉淀物质，放置过久沉淀过多则不利于反应，而班氏试剂是斐林试剂的改良，它利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂，使溶液稳定、灵敏度高且可以长期使用，故更简便。

　　3.利用斐林试剂或班氏试剂可以进行尿糖检测。

　　实验原理 尿液中葡萄糖属可溶性还原糖，可以用班氏试剂或斐林试剂检验。

　　材料器具 人体新鲜尿液，试管，酒精灯，试管夹，火柴，滴管，班氏试剂。

　　步骤

　　(1)在试管中加入1mL班氏试剂，加热到沸腾，如不变色，则可使用。

　　(2)再在试管中滴人2滴新鲜澄清的尿液，摇匀。

　　(3)加热上述混合液到沸腾，并持续2min～3min。

　　(4)观察试管内混合液颜色是否发生变化，是否有沉淀物产生，并按表5提示作出判断记录。

　　混合液现象 —记录符号 含糖量

　　混合液呈蓝色或蓝灰色 - 0.02g/100mL

　　出现浅黄绿色沉淀 + (0.1～0.5g)/100mL

　　出现黄绿色沉淀 ++ (0.5～1.4g)/100mL

　　出现黄色沉淀 +++ (1.4～2.0g)/100mL

　　出现橘黄色沉淀 ++++ 2.0g/100mL

　　注意事项：

　　(1)班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10：1。

　　(2)如是糖尿病人，检验前两三天最好停止服药。

　　了解 生物化学试剂的配置在同学们的生物学习中显得特别重要。因为。我们接触到的各种各样的生物实验都需要化学试剂。希望这篇文对大家有帮助。